Status von Alternativmethoden zur Bestimmung der Aktivität von Botulinum Neurotoxin-Produkten auf BfR-Expertentagung evaluiert

Botulinum Neurotoxin enthaltende Arzneimittel werden zu vielerlei Zwecken eingesetzt, bei der Behandlung von Lidkrämpfen oder Schielen bis hin zur Faltenglättung in der ästhetischen Medizin . Die Aktivität der Botulinum Neurotoxin-Produkte (BoNT-Produkte) wird noch immer mit einem behördlich vorgeschriebenen LD50-Aktivitätstest an Mäusen bestimmt. Am 27. und 28. April 2009 fand in Berlin ein vom Bundesinstitut für Risikobewertung (BfR) organisiertes internationales Sachverständigengespräch über den Fortschritt von Alternativmethoden zu dieser für die Tiere qualvollen Testmethode statt. Das Ziel des BfR ist es, diesen Test so schnell wie möglich durch international anerkannte Alternativmethoden zu ersetzen oder die Anzahl der Versuchstiere wenigstens zu reduzieren , sagte BfR-Präsident Professor Dr. Dr. Andreas Hensel. Die im BfR angesiedelte Zentralstelle zur Erfassung und Bewertung von Ersatz- und Ergänzungsmethoden zum Tierversuch (ZEBET) hatte die Experten aus Wissenschaft, Behörden, Industrie sowie Vertreter des Tierschutzes geladen, um den Stand der Entwicklung verschiedener Alternativmethoden vorzustellen und diese Ansätze hinsichtlich ihrer Eignung zu bewerten, den klassischen LD50-Test zu ersetzen. Die Experten kamen übereinstimmend zu der Auffassung, dass der LD50-Test bei BoNT-Produkten derzeit noch nicht vollständig ersetzt werden kann. Durch verbesserte statistische Methoden der Auswertung ist es jedoch möglich, die Zahl der benötigten Tiere um bis zu 50 % zu reduzieren.

Botulinum Neurotoxin (BoNT) wird von dem Bakterium Clostridium botulinum produziert und ausgeschieden. Es ist das stärkste bekannte Nervengift und führt nach Injektion aufgrund der Hemmung der Erregungsübertragung von den Nervenzellen zu den Muskeln zu einer Lähmung. BoNT hat in zunehmendem Masse vielfältige medizinische Indikationsgebiete; so wird es z. B. bei Schielen, Lidkrämpfen oder verschiedenen Spastiken bzw. muskulären Kontrakturen eingesetzt. Gerade im therapeutischen Bereich gibt es bei sehr schwerwiegenden und leidvollen Erkrankungen eine wachsende Zahl von Anwendungsbereichen für dieses Toxin. In der kosmetischen Medizin wird es ausserdem zur Reduzierung von Gesichtsfalten verwendet.

Aufgrund der hohen Toxizität der BoNT-Produkte verlangen die Zulassungsbehörden Deutschlands, der EU und der USA die genaue Aktivitätsbestimmung jeder Produktionseinheit, die auf den Markt gebracht wird. Geprüft wird in diesem Zusammenhang nicht nur jede Charge eines Arzneimittels vor der Freigabe für den Patienten. Tests müssen auch durchgeführt werden, um die Stabilität des Produktionsprozesses und damit die gleichbleibende Qualität der Arzneimittel sicherzustellen. Der Standardtest für BoNT, der bislang noch nicht durch Alternativmethoden ersetzt werden konnte, ist der LD50-Aktivitätstest. Hierbei werden Mäusen unterschiedliche Konzentrationen von BoNT gespritzt und die BoNT-Konzentration ermittelt, bei der 50 % der Tiere sterben. Da dieser Test für die behandelten Tiere qualvoll ist, bemüht man sich weltweit, alternative Methoden zu entwickeln, die diesen Test ersetzen oder zumindest das Leiden der Tiere vermindern können.

Auf dem zweitägigen Sachverständigengespräch in Berlin bewerteten die Teilnehmer die bisher entwickelten Alternativmethoden und erarbeiteten Empfehlungen, wie das sogenannte 3R-Konzept (Replace – Ersetzen; Refine – Verfeinern; Reduce – Verringern) in die Testverfahren in der Produktion und zur Freigabe der BoNT-Produkte eingebunden werden könnte. Beteiligt waren Vertreter von internationalen Zulassungsbehörden, Herstellern, Validierungszentren, aus der Wissenschaft und von Tierschutzverbänden.

Nachdem es auf vorausgegangenen Expertentreffen zu dieser Problematik bislang noch nicht gelungen war, einen Fortschritt zu erzielen, wurden nun auf dem von der ZEBET organisierten Expertengespräch erfolgversprechende Perspektiven sichtbar. So wurde eine BoNT Expert Working Group mit Vertretern aus Wissenschaft, Behörden und Industrie ins Leben gerufen, die sich in regelmässigen Abständen mehrmals im Jahr im BfR treffen soll, um über neue Erkenntnisse auf dem Gebiet der Alternativmethoden zum LD50-Aktivitätstest zu diskutieren und Kriterien für die behördliche Akzeptanz dieser Tests zu definieren. ZEBET soll auf Wunsch aller Beteiligten die Leitung und Koordination dieser Working Group“ übernehmen.

Die Experten waren sich darin einig, dass der LD50-Aktivitätstest derzeit noch nicht vollständig ersetzt werden kann. Allerdings ist es gelungen, durch verbesserte Auswertungsmethoden die Zahl der benötigten Versuchstiere deutlich zu reduzieren. Ausserdem sollen die Experten der BoNT Expert Working Group“ den Herstellern dabei helfen, das 3R-Prinzip optimal in den Tests zur Überwachung der Produktion und Chargenfreigabe umzusetzen. Aufgabe dieser Experten wird es zudem sein, Empfehlungen zur zügigen Validierung und behördlichen Akzeptanz schonender Methoden für die Zulassung und Freigabe von BoNT-Produkten zu erarbeiten und zu publizieren.

Bundesinstitut für Risikobewertung